Bacillus subtilis, juga dikenali sebagai hay bacillus atau grass bacillus, ialah bakteria Gram-positif, katalase-positif, ditemui di dalam tanah dan saluran pencernaan ruminansia dan manusia. Merupakan naggota genus Bacillus, B. subtilis ialah berbentuk batang, dan dapat membentuk endospora pelindung yang keras, memungkinkan untuk mentoleransi keadaan persekitaran yang ekstrem. B. subtilis dari segi sejarah telah diklasifikasikan sebagai aerob wajib, meskipun terdapat bukti bahawa bakteria ini ialah anaerob fakultatif. B. subtilis dianggap sebagai bakteria Gram-positif yang dipelajari paling baik dan organisme model untuk mempelajari replikasi kromosom bakteria dan pembezaan sel. Bakteria ini ialah salah satu bakteria dalam produksi enzim yang dirahsiakan dan digunakan pada skala industri oleh syarikat bioteknologi.